胎牛血清沉淀成因与应对策略

发布时间:2025-07-01 / 浏览数:8

胎牛血清的沉淀形成并非偶然,而是多种因素共同作用的结果:


1、温度波动

血清在反复冻融或储存温度不稳定(如未严格保持在-20℃或更低)时,蛋白质溶解度下降,极易析出。这就好比在炎热的夏天,原本溶解在水中的糖,当水温降低时,多余的糖就会结晶析出。


2、物理应力

剧烈摇晃、震荡或不当的移液操作(产生气泡)会破坏溶液中蛋白质的稳定状态,促使聚集。想象一下平静的湖面,当被外力剧烈搅动时,水面会泛起层层涟漪,甚至形成漩涡,血清中的蛋白质在物理应力的作用下也是如此。


3、时间因素

长期储存,尤其是不理想条件下,沉淀形成几率显著增加。就像存放时间过长的食物会变质一样,血清在不良储存环境下,随着时间的推移,其内部成分也会发生变化,导致沉淀的产生。


4、成分特性

血清本身富含易沉淀物质,如纤维蛋白原(凝血关键因子)、脂蛋白及矿物质离子。这些成分的存在,使得血清在特定条件下更容易出现沉淀现象。


如何避免胎牛血清出现沉淀:


遇到血清沉淀,首先判断沉淀类型。若是纤维蛋白析出造成的絮状沉淀,可400-600g离心5-10分钟,取上清使用,不影响血清活性。若沉淀较多且性质不明,可将血清在37°C水浴短暂加热,使蛋白溶解,再轻柔混匀。注意避免剧烈摇晃,防止产生更多沉淀。同时,尽量采用2-8℃缓慢解冻血清,减少反复冻融,能从源头降低沉淀产生几率。


血清解冻后出现絮状沉淀,其实是纤维蛋白析出。后来改成逐步解冻(4℃过夜→室温复温),解冻时轻轻摇晃,沉淀明显减少;如果已经产生沉淀,用3000rpm离心 10分钟,上清液可正常使用,不影响细胞培养。


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