细胞接收后的处理要点
发布时间:2025-07-14 / 浏览数:9
在细胞研究中,确保细胞在接收后的正确处理是开展后续实验的基础,否则可能影响研究进展。以下是收到细胞后的详细处理步骤:
一、镜检确认细胞状态
收到细胞后,首先要进行镜检,重点关注以下方面:
观察细胞形态是否正常。
对于贴壁细胞,需留意其贴壁状况是否良好。
查看细胞密度。
若有任何疑问,应及时咨询提供细胞的技术人员。由于运送过程中时间或温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里,生长状况会与平时有所不同,主要体现在贴壁牢固度上。例如 293T 细胞,平时贴壁就不牢固,在装满培养基的瓶子中,可能会出现大片脱落、细胞聚集的情况,但细胞生长仍属正常,通过离心收集、胰酶消化后重新打散,仍可正常贴壁生长。
二、根据细胞密度进行后续操作
情况 1:细胞密度约 80% 且状态正常
当镜检发现细胞密度达到 80% 左右,且状态无异常时,按以下步骤处理:
弃除瓶中大部分培养基,仅保留 5 到 10mL 培养所需的常规培养基;或直接更换新鲜培养基。
将细胞置于培养箱中,之后每天进行观察。
需要注意的是,细胞在低于正常生长温度的环境下,会进入停止期或缓慢生长期,必须在 37℃环境中恢复至少 3 小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态。在对数生长期进行细胞传代,能大幅提高传代成功率和细胞存活率。
情况 2:细胞密度超 90% 且状态良好
若镜检发现细胞密度超过 90%,且细胞状态良好,需在复温后 2 小时内立即传代,传代比例根据细胞类型而定:
对于生长较快、状态稳定、不易受外界影响的细胞,可一次多传几瓶。
对于生长较慢、细胞较薄、状态易波动的细胞,一次应少传些,保证每瓶细胞密度较大,便于稳定生长。
对于较为陌生的细胞,首次处理也可参考情况 1 的方式操作。
按照以上步骤处理收到的细胞,能有效避免细胞出现问题,为后续研究提供良好的细胞材料。
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