胎牛血清——阳性转染细胞克隆的筛选
发布时间:2026-02-08 / 浏览数:6
一些有基因缺陷的细胞株如CHO-DFGRˉ,缺乏二氢叶酸还原酶(DHFR),必须在添加了次黄嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的培养液中才能存活。可将我们想要表达的目的基因和DHFR基因构建质粒,然后转染细胞,用不含上述添加剂的培养基进行培养。
未转入重组质粒的缺陷细胞会凋亡;成功转入重组质粒的细胞会存活下来,形成细胞克隆。为避免胎牛血清中次黄嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的干扰,这时就需要用到透析胎牛血清,以保证完全培养液中不含次黄嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸。