鸡血血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性检测实验
发布时间:2026-02-27 / 浏览数:3
实验原理
乳酸脱氢酶(LDH)是胞内酶,鸡血血浆中 LDH 活性极低,当机体组织(如肝脏、心肌、红细胞)受损时,胞内 LDH 释放至血浆,导致活性升高。LDH 可催化乳酸转化为丙酮酸,同时将 NAD⁺还原为 NADH,NADH 在340nm有特征吸收峰,通过检测吸光度的变化速率,可定量计算 LDH 活性,反映组织损伤程度。
操作步骤
鸡血血浆制备:抗凝鸡血 3000rpm 离心 10 分钟,取上层血浆,避免溶血(溶血会导致 LDH 活性假性升高)。
反应体系构建:试管中加入缓冲液、乳酸溶液、NAD⁺溶液各 1mL,混匀后 37℃预热 5 分钟;加入 50μL 鸡血血浆,迅速混匀并放入分光光度计。
动态检测:连续记录340nm 处吸光度随时间的变化(持续 3 分钟),计算吸光度变化速率(ΔOD/min)。
活性计算:根据摩尔消光系数,计算 LDH 活性单位(鸡血血浆正常 LDH 活性:100~200U/L)。
应用
评估兽药、毒素对鸡肝脏、心肌、红细胞的损伤程度;
禽病模型(如肝炎、心肌损伤、溶血性贫血)的生化指标评价;
监测鸡群的健康状况,作为组织损伤的早期筛查指标。