摘要：溶血空斑实验（PFC）是Jerne于1963年设计的体外检测抗体形成细胞功能的生物学方法，主要用于评估机体体液免疫功能。

实验原理

溶血空斑实验其原理是将绵羊红细胞（SRBC）免疫动物后，取家兔淋巴结或小鼠脾细胞与SRBC在补体参与下形成溶血空斑，每个空斑代表一个抗体形成细胞，空斑数量可反映免疫应答强度

操作方法

1、直接法

经典的溶血斑试验用于检测实验动物抗体形成细胞的功能，其原理是将绵羊红细胞（SRBC）免疫小鼠，4天后取出脾细胞，加入SRBC及补体，混合在温热的琼脂溶液中，浇在平皿内或玻片上，使成一蒲层，置37℃温育。由于脾细胞内的抗体生成细胞可释放抗SRBC抗体，使其周围的SRBC致敏，在补体参与下导致SRBC溶血，形成一个肉眼可见的圆形透明溶血区而成为溶血空斑（plaque）。每一个空斑表示一个抗体形成细胞，空斑大小表示抗体生成细胞产生抗体的多少。这种直接法所测的细胞为IgM生成细胞，其他类型Ig由于溶血效应较低，不能直接检测，可用间接检测法。

2、间接法

间接测试即在小鼠脾细胞和SRBC混合时，再加抗鼠Ig抗体（如兔抗鼠Ig），使抗体与细胞所产生的IgG或IgA与抗Ig抗体结合成复合物，此时能激活补体途径导致SRBC发生溶血，称间接空斑试验。

3、补充

上述直接和间接空斑形成试验都只能检测抗红细胞抗体的产生细胞，而且需要事先免疫，难以检测人类的抗体产生情况。如果用一定方法将SRBC用其它抗原包被，则可检查与该抗原相应的抗体产生细胞，这种非红细胞抗体溶血空斑试验称为空斑形成试验，它的应用范围较大。