原理

主要是蛋白胨和牛肉粉用来提供细菌生长所需的碳源、氮源、氨基酸以及维生素。

氯化钠维持培养基中的渗透压，琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血提供氯化血红素和辅酶I，为嗜血杆菌属的生长提供特殊营养。

巧克力平板培养基还能够培养其他细菌，主要的原因是血液中有V、X因子，这两种因子是位于红细胞中的，一般细菌不能利用，轻微的加热（一般为75~85摄氏度左右）使红细胞破坏释放到细胞外方可利用。

材料与仪器

实验材料：脱纤维羊血；

试剂、试剂盒：牛肉粉、琼脂、蒸馏水、氯化钠、蛋白胨；

仪器、耗材：85℃水浴锅、量筒、称量天平、超净工作台、高压蒸气锅、玻璃平皿、pH计。

步骤

1. 将除脱纤维羊血外的主要成分混合，校正pH在7.2——7.4，高压灭菌后，冷却至85℃；

2. 无菌方法加入脱纤维羊血（兔血），摇匀后置于85℃水浴中，维持该温度10分钟，使之成巧克力色；

3. 取出，置于室温冷却至约50℃，倾制平板。

注意事项

1. 外观：巧克力平板培养基应为巧克力色固体，表面平整，不得有裂痕。且培养基不得有肉眼可见气泡及肉眼可见物（但允许有少量肉眼可见纤维）；

2. pH值应在7.2±0.2；

3. 无菌要求：将巧克力平板培养基置于37℃±2℃培养箱中培养7天，不得有菌生长。