1.注意此细胞为SV40病毒转染构建的永生化细胞，细胞需要使用ECM专用的培养基，建议查找ECM专用培养基购买使用，配套有血清和生长因子；
2.到货细胞复苏长满后1:4-1:6传代，细胞传代时密度不能太高；
3.如果无特殊实验需求，建议对细胞进行保种留存，即每次都1:6传代，即需要1个T25瓶传6个T25瓶，细胞再次长满T25瓶后，冻存保种5瓶，留一瓶继续1:6传代培养；
4.细胞培养过程中，需要每两天弃掉旧的培养基清洗并更换新的培养基，换液频率要维持此水平，以保证细胞的正常扩增。
5.细胞贴壁不牢，注意严格控制消化时间，切忌消化过头。
6.终止消化尽量单独配置DMEM/F12+10%FBS或DMEM+10%FBS完培，不能直接使用ECM培养基；
7.1ml 0.25%的EDTA胰酶对应3ml的培养基来终止消化会比较彻底不会残留胰酶刺激细胞膜。
8.注意此细胞不能擅自更换除ECM专用培养基以外的其他培养体系，更换导致的细胞问题，不予售后； 
9.细胞培养环境：将细胞培养在37℃、5% CO2和95%相对湿度的环境中，以提供适宜的生长条件。
10.传代和传代培养：当细胞生长到80%汇合度时，可以进行传代。使用0.25%的胰蛋白酶消化细胞，并按照推荐的比例进行传代培养。
11.细胞换液：在培养过程中，根据需要更换新鲜的完全培养基，以清除代谢产物和维持细胞生长。
12.观察和记录：定期观察细胞的生长状态和形态，并记录相关信息。如果发现细胞出现异常，及时采取措施进行处理。
13.注意事项：

在进行HUVEC细胞培养时，需要注意以下几点：

避免使用未经推荐的试剂和药物，以免对细胞造成损害。

保持培养环境的清洁和无菌，防止污染。

在操作过程中，要遵循无菌原则。

14.HUVEC的原代细胞形体偏向于较为规整的鹅卵石样的铺路石状态；
15.我们HUVEC的细胞为SV40转染的有限代次的传代细胞系，目前传代细胞系的培养图片如上图所示，细胞在密度较低时偏向于长一点细胞，要注意每两天换液清洗一次，保证细胞形态；
16.细胞汇合度较高时接近于原代细胞的铺路石状态，此时需要及时传代，传代比例1:4-1:6传代，HUVEC细胞在培养过程中可传代10-15代之间，要注意及时保留细胞种子，以免代次过高；