哺乳动物细胞常规培养实验

发布时间:2025-08-10 / 浏览数:3

实验原理

牛血清(如胎牛血清 FBS)富含氨基酸、生长因子(如 EGF、胰岛素)、激素、矿物质等营养成分,可模拟体内微环境,为体外培养的哺乳动物细胞提供营养支持、贴壁因子及抗凋亡信号,维持细胞存活与增殖。

胎牛血清 FBS


操作步骤


1、配制完全培养基:按比例(通常 10%)将牛血清加入基础培养基(如 DMEM、RPMI-1640),添加青霉素 / 链霉素除菌;

2、细胞复苏:从液氮中取出冻存细胞,37℃水浴快速融化,离心去除冻存液,重悬于完全培养基;

3、接种与培养:将细胞悬液接种至培养瓶,置于 37℃、5% CO₂培养箱,每日观察细胞形态及密度;

4、传代:当细胞汇合度达 80%-90% 时,用胰酶消化后按比例传代,补充新鲜完全培养基。

      应用:用于细胞系维持、基因编辑模型构建、蛋白质表达等基础研究及生物制药上游工艺。


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