特异性抗体(如抗流感病毒抗体)能与病毒表面的血凝素结合,阻断病毒与兔红细胞受体的相互作用,从而抑制红细胞凝集;通过该现象可检测待检样品中特异性抗体的效价。
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抗体稀释:在 96 孔板中,用生理盐水倍比稀释待检血清(1:2 至 1:256),每孔 50μL;设阳性血清对照、阴性血清对照及生理盐水对照。
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病毒孵育:每孔加入 50μL 预先滴定好的 “4 个血凝单位(HAU)” 病毒液,37℃孵育 15 分钟(让抗体与病毒充分结合)。
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红细胞反应:每孔加入 50μL 1% 兔红细胞悬液,37℃孵育 30 分钟,观察凝集抑制现象。
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结果判断:能完全抑制凝集的血清最高稀释度即为 HI 效价;阳性对照孔应出现抑制,阴性 / 空白对照孔应出现凝集。
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检测动物或人血清中抗血凝性病毒(如流感、禽流感病毒)的抗体水平;
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病毒血清型鉴定(通过已知型特异性抗体抑制未知病毒的凝集);
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疫苗免疫效果评价(如流感疫苗接种后抗体效价监测)。