豚鼠红细胞表面存在补体受体 1(CR1),可与激活的补体片段(如 C3b)结合;若待检样本中存在免疫复合物(IC),IC 可激活补体并结合 C3b,进而通过 C3b 与红细胞 CR1 结合,形成 “红细胞 - IC” 复合物,通过显微镜观察或计数判断免疫黏附能力。
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1.免疫复合物制备:将牛血清白蛋白(BSA)与抗 BSA 抗体按比例混合,37℃孵育 15 分钟,制成 BSA - 抗 BSA 免疫复合物(IC)。
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2.黏附反应:取 50μL 2% 豚鼠红细胞悬液、50μL IC 溶液、50μL 豚鼠补体(1:20 稀释),37℃孵育 20 分钟,轻轻混匀。
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3.观察计数:取 10μL 反应液涂片,瑞氏染色后显微镜观察(400×),计数 100 个红细胞中黏附 IC 的阳性红细胞数,计算阳性率(免疫黏附率)。