某些药物(如抗生素、化疗药、中药提取物)可能直接损伤兔红细胞膜,或通过氧化应激导致膜蛋白变性、脂质过氧化,最终引起红细胞破裂溶血;通过检测不同药物浓度下的溶血率,评价药物的红细胞毒性。
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药物稀释:用生理盐水将待检药物(如庆大霉素、顺铂、中药煎剂)配制成系列浓度(0.1μg/mL 至 1000μg/mL),设生理盐水(阴性对照,不溶血)和蒸馏水(阳性对照,完全溶血)。
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溶血反应:每管加入 1mL 药物溶液 + 0.1mL 2% 兔红细胞悬液,37℃孵育 1 小时,期间每隔 15 分钟轻轻振荡 1 次。
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溶血率计算:3000rpm 离心 5 分钟,取上清液在 540nm 处测吸光度(OD 值),按公式计算溶血率:溶血率(%)=(药物组 OD 值 - 阴性对照组 OD 值)/(阳性对照组 OD 值 - 阴性对照组 OD 值)×100%。