大鼠血浆丙二醛(MDA)含量检测实验
发布时间:2025-12-24 / 浏览数:79
实验原理
MDA 是脂质过氧化的终产物,可与硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热反应生成红色的 MDA-TBA 加合物,该加合物在 532nm 处有最大吸收峰,吸光度值与 MDA 含量正相关,以此定量检测氧化损伤程度。
操作步骤
1. 样品处理:取 500μL 大鼠血浆,加入 TBA 试剂和酸性缓冲液,充分混匀。
2. 加热反应:沸水浴中加热 15 分钟,取出后迅速冰浴冷却终止反应。
3. 离心与检测:3000rpm 离心 10 分钟,取上清液在 532nm 处测吸光度。
4. 含量计算:根据 MDA 标准曲线计算血浆中 MDA 的浓度。
应用
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评价药物、毒物或应激状态对大鼠机体的氧化损伤; 研究抗氧化剂(如维生素 E、黄芪多糖)对大鼠血浆氧化应激水平的调节作用。 |