实验原理

小鼠血清中的补体系统可被致敏绵羊红细胞激活，通过经典途径介导红细胞溶血；能使 50% 致敏红细胞溶血的血清稀释度，即为补体总活性（CH50 值），反映补体系统的整体功能。

操作步骤

1. 致敏红细胞制备：绵羊红细胞用生理盐水洗涤 3 次，配制成 2% 悬液，加入等量溶血素（抗绵羊红细胞抗体），37℃孵育 20 分钟。

2. 血清稀释：小鼠血清用巴比妥缓冲液做 2 倍梯度稀释（1:5 至 1:640），每管 500μL。

3. 溶血反应：每管加入 500μL 致敏红细胞悬液，37℃孵育 30 分钟，3000rpm 离心 5 分钟。

4. 结果计算：测上清液 413nm 吸光度值，计算溶血率；以溶血率 50% 对应的血清稀释度为 CH50 值。

应用

• 研究自身免疫病、感染性疾病模型小鼠的补体系统激活状态；

• 评价免疫调节剂对小鼠补体活性的调节作用。