实验目的：

通过观察红细胞凝集现象判断病毒是否存在，检测鸡血清中相关抗体水平。

关键材料：

待检测样品、1%鸡红细胞、96孔血凝板、移液器及吸头、PBS缓冲液、恒温箱等。

实验步骤：

1. 准备工作：在96孔V型微量反应板中，每孔加0.025 mL PBS。

2. 加样与稀释：第1孔加0.025mL抗原或病毒液并混匀，然后从第1孔吸取0.025mL加入第2孔，混匀后吸取0.025mL加入第3孔，进行2倍系列稀释至第11孔，从第11孔吸取0.025 mL弃去，第12孔为PBS对照孔。

3. 添加红细胞：每孔加0.025 mL PBS后，再每孔加入0.025 mL 1%鸡红细胞悬液。

4. 结果判定：轻扣反应板混合反应物，室温（约20 ℃）静置40min，环境温度过高时可在4℃条件下静置60 min，当对照孔的红细胞呈显著纽扣状时判定结果。将反应板倾斜60°，观察红细胞有无泪珠状流淌，完全无泪珠样流淌（100%凝集）的最高稀释倍数判为血凝效价。