细胞的体外培养与环境条件密切相关，只有在适宜的环境中，细胞才能正常生长繁殖。以下从多个关键方面详细介绍细胞培养所需的环境条件：

首先是无菌环境，这是体外培养细胞的首要前提。在活体内，细胞能借助机体的解毒系统和免疫系统抵御微生物及有害物质的侵害，但在体外培养时，细胞失去了这样的保护，因此必须确保无菌工作区域、操作人员良好的个人卫生、所使用的试剂和培养基无菌，同时严格执行无菌操作。常见的微生物污染包括支原体、细菌和真菌。其中，支原体无致死毒性，可与细胞长期共存，对细胞存在潜在影响，且体积小不易鉴别，需通过地衣红或 Hoechst33342 染色检测；细菌增殖速度快，短时间内就能大量扩增并产生毒素杀死细胞；真菌种类繁多，肉眼可见，常漂浮于培养液表面，形态呈丝状、管状或树枝状等。

其次是合适的温度。一般而言，哺乳类与禽类细胞体外培养的适宜温度为 37～38℃，环境温度不适会直接影响细胞生长。细胞对低温的耐受能力强于高温，在低温环境下，细胞的代谢活力和核分裂能力会降低。当温度不低于 0℃时，虽然细胞代谢会受影响，但不会造成损伤；在 25～35℃时，细胞生长速度缓慢；而若将细胞置于 40℃环境中数小时，不仅不利于其生存和生长，甚至可能导致死亡。

再者是气体环境与PH。细胞体外培养需要理想的气体环境，氧气和二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞的生存、代谢及合成过程提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，也是细胞生长的必需成分，同时还与维持培养液的 pH 有关。大多数细胞适宜的 pH 范围为 7.2～7.4，在开放式培养中，通入 5% 的二氧化碳气体较为适宜。

最后是适宜的渗透压。高渗或低渗溶液会导致细胞出现褶皱、肿胀、破裂等情况，因此渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压有一定耐受能力，在实际应用中，260～320mmol/L 的渗透压可满足大多数细胞的培养需求。