MTT 法细胞增殖活力检测实验
发布时间:2025-08-12 / 浏览数:7
实验原理:
活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶可将黄色 MTT(噻唑蓝)还原为蓝紫色甲瓒结晶,结晶量与活细胞数成正比;牛血清为细胞提供增殖所需营养,保证实验体系稳定性。
操作步骤:
1、细胞接种:将对数期细胞用含 10% FBS 的培养基稀释,接种至 96 孔板(每孔 100μL,约 5×10³ 细胞);
2、处理与培养:加入不同浓度药物 / 处理因素,设空白对照组,37℃培养 24-72 小时;
3、MTT 显色:每孔加 20μL MTT 溶液(5mg/mL),继续培养 4 小时,弃上清,加 150μL DMSO 溶解结晶;
4、检测:酶标仪测 490nm 处吸光度(OD 值),计算细胞存活率(实验组 OD / 对照组 OD×100%)。
应用:评估药物、毒素、辐射等对细胞增殖的影响,筛选抗肿瘤 / 抗病毒候选药物。
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