实验原理：

利用抗原 - 抗体特异性结合，以酶标记抗体为信号放大工具，通过显色强度定量牛血清中目标抗体（如牛病毒性腹泻病毒抗体）。

操作步骤：

1、包被：将病毒抗原稀释后包被 ELISA 板，4℃孵育过夜，洗板 3 次；

2、封闭：加 5% 脱脂奶粉（或 1% BSA）封闭非特异性位点，37℃孵育 1 小时，洗板；

3、加样：将待检牛血清用稀释液（含 1% FBS）梯度稀释，加入孔中，37℃孵育 1.5 小时，洗板；

4、加酶标二抗：加入 HRP 标记的抗牛 IgG 二抗，37℃孵育 1 小时，洗板；

5、显色与读数：加 TMB 底物显色 10-15 分钟，加终止液，酶标仪测 450nm OD 值，计算抗体效价。

      应用：牛群传染病（如口蹄疫、布鲁氏菌病）的血清学诊断与免疫水平监测。