血凝抑制实验(HI 实验,以流感病毒为例)
发布时间:2025-08-14 / 浏览数:88
实验原理:
流感病毒表面血凝素(HA)可与红细胞表面受体结合引发血凝;若牛血清中存在抗流感病毒抗体,可竞争性结合 HA,抑制血凝现象,通过抑制效价反映抗体水平。
操作步骤:
1、血清处理:待检牛血清 56℃灭活 30 分钟,去除非特异性抑制物;
2、倍比稀释:在 96 孔板中用 PBS(含 0.5% 牛血清白蛋白)将血清做 2 倍梯度稀释(1:2 至 1:1024);
3、加病毒:每孔加等量标准化流感病毒液(含 4 个血凝单位),37℃孵育 30 分钟;
4、加血红细胞:每孔加 1% 鸡红细胞悬液(或豚鼠红细胞),室温静置 30 分钟;
5、结果判断:以完全抑制血凝的最高血清稀释度为 HI 效价。
应用:流感病毒亚型鉴定、牛群流感抗体效价评估及疫苗免疫效果评价。