实验原理：

原代肝细胞对营养需求苛刻，牛血清（尤其是 FBS）可提供肝细胞存活必需的生长因子（如 HGF）和黏附因子，减少细胞凋亡，维持肝功能活性。

操作步骤：

1、组织获取：无菌取新生牛肝脏，用 PBS 冲洗去除血液；

2、消化分离：剪成 1mm³ 小块，用胶原酶 Ⅳ 消化 20-30 分钟，过滤获得单细胞悬液；

3、纯化接种：离心沉淀细胞，用含 15% FBS 的威廉姆斯 E 培养基重悬，接种至胶原包被的培养皿；

4、培养维护：24 小时后更换培养基去除未贴壁细胞，后续每 48 小时换液，观察细胞形态及肝功能（如白蛋白分泌）。

      应用：肝毒性检测、药物代谢研究、肝炎病毒感染模型建立。