细胞毒性实验(LDH 释放法)
发布时间:2025-08-17 / 浏览数:6
实验原理:
乳酸脱氢酶(LDH)存在于活细胞胞质中,当细胞因毒性物质受损时,LDH 释放到培养基中;牛血清维持细胞正常生理状态,确保毒性效应仅由处理因素引起。
操作步骤:
1、细胞接种:用含 10% FBS 的培养基将细胞接种至 96 孔板,培养 24 小时贴壁;
2、毒性处理:加入不同浓度的待检物质(如药物、毒素),设阴性对照组(正常细胞)和阳性对照组(1% Triton X-100 裂解细胞);
3、LDH 检测:培养 24-48 小时后,取上清按 LDH 检测试剂盒说明操作,测 490nm OD 值;
4、计算毒性:细胞毒性率 =(实验组 OD - 阴性组 OD)/(阳性组 OD - 阴性组 OD)×100%。
应用:评估化学物质、纳米材料、病毒等对细胞的毒性强度,筛选低毒性候选药物。
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