病毒 TCID₅₀测定实验
发布时间:2025-08-18 / 浏览数:54
实验原理:
TCID₅₀(50% 组织培养感染剂量)是衡量病毒感染力的指标,指能使 50% 培养细胞产生病变的病毒稀释度;含牛血清的培养基保证细胞存活,便于观察病毒致病变效应。
操作步骤:
1、细胞准备:用含 10% FBS 的培养基培养敏感细胞至 90% 汇合,消化后铺 96 孔板;
2、病毒稀释:将病毒用维持培养基(含 2% FBS)做 10 倍梯度稀释(10⁻¹ 至 10⁻⁸);
3、接种与培养:每稀释度接种 8-10 孔细胞,每孔 100μL,37℃培养 5-7 天,每日观察 CPE;
4、结果计算:记录各稀释度 CPE 阳性孔数,按 Reed-Muench 法计算 TCID₅₀。
应用:定量病毒滴度,用于病毒增殖动力学研究、疫苗效力测定及抗病毒药物筛选。