Annexin V/PI 双染细胞凋亡检测实验
发布时间:2025-08-19 / 浏览数:61
实验原理:
凋亡细胞细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻,可与 Annexin V 特异性结合;牛血清维持细胞体外存活,避免因营养缺乏导致的非特异性凋亡,确保实验准确性。
操作步骤:
1、细胞处理:用含 10% FBS 的培养基培养细胞,加入凋亡诱导剂(如顺铂)处理特定时间;
2、细胞收集:胰酶消化细胞,离心收集,PBS 洗涤 2 次;
3、染色:按试剂盒说明,加入 Annexin V-FITC 和 PI 染液,室温避光孵育 15 分钟;
4、检测:流式细胞仪检测,Annexin V⁺/PI⁻为早期凋亡细胞,Annexin V⁺/PI⁺为晚期凋亡细胞。
应用:研究细胞凋亡机制,评估药物、辐射等诱导的凋亡效应,筛选凋亡相关靶点。