实验原理：

杂交瘤细胞（骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合）需在含牛血清的培养基中生长，血清提供融合细胞存活、增殖及抗体分泌所需的营养和生长因子（如 IL-6）。

操作步骤：

1、细胞融合：将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（如 SP2/0）用 PEG 融合，接种至 96 孔板；

2、筛选培养：用含 10% FBS 的 HAT 选择培养基培养，淘汰未融合的骨髓瘤细胞和脾细胞；

3、克隆化：对阳性孔细胞用有限稀释法或软琼脂法克隆，筛选稳定分泌抗体的单克隆细胞；

4、扩大培养与抗体纯化：将阳性克隆转移至培养瓶，用含 FBS 的培养基扩大培养，收集上清纯化单克隆抗体。

      应用：制备抗牛病原体（如牛结核杆菌、牛疱疹病毒）的单克隆抗体，用于诊断试剂研发或免疫检测。