实验原理

兔红细胞（作为靶细胞）与特异性抗兔红细胞抗体（溶血素）结合形成 “抗原 - 抗体复合物”，该复合物可激活补体系统（如豚鼠补体）的经典途径，最终形成膜攻击复合物（MAC），导致红细胞破裂溶血；溶血程度与补体量或抗体量呈正相关。

操作步骤

1. 体系配制：在试管中加入 50μL 1% 兔红细胞悬液、50μL 稀释的抗兔红细胞抗体（预先滴定至亚溶血剂量），37℃孵育 10 分钟（让抗体结合红细胞）。

2. 补体反应：加入 50μL 系列稀释的补体（如豚鼠血清，1:10 至 1:100），37℃孵育 30 分钟；设 “红细胞 + 抗体”（无补体，不溶血）、“红细胞 + 补体”（无抗体，不溶血）为对照。

3. 结果测定：3000rpm 离心 5 分钟，取上清测 540nm 吸光度，计算溶血率（以蒸馏水溶血为 100%）。

应用

• 定量检测补体活性（如补体 C3、C5 缺陷模型的验证）；

• 筛选补体抑制剂（如中药成分、小分子化合物对补体激活的抑制作用）；

• 研究自身免疫病机制（如模拟补体介导的红细胞破坏过程）。