实验原理

某些病毒（如流感病毒、副流感病毒）在宿主细胞（如 MDCK 细胞）表面增殖后，会表达病毒血凝素（HA）；HA 能与兔红细胞表面的唾液酸受体结合，使兔红细胞吸附在感染病毒的宿主细胞表面，形成 “红细胞花环”，未感染细胞则无吸附现象。

操作步骤

1. 细胞培养：在 6 孔板中培养 MDCK 细胞（或其他易感细胞），待细胞长成单层后，接种待检病毒液，37℃、5% CO₂孵育 24-48 小时。

2. 红细胞处理：弃去培养上清，用 PBS 洗细胞 2 次，加入 1mL 0.5% 兔红细胞悬液，37℃孵育 30 分钟。

3. 洗涤与观察：用 PBS 轻轻洗去未吸附的红细胞，倒置显微镜下观察；感染细胞表面会吸附红细胞形成 “花环”，未感染细胞无吸附。

应用

• 检测培养细胞中血凝性病毒的感染情况（如病毒分离鉴定）；

• 病毒增殖动力学研究（观察不同时间点病毒在细胞表面的表达）；

• 抗病毒药物筛选（评价药物对病毒在细胞表面表达 HA 的抑制效果）。