利用荧光探针(如 1,6 - 二苯基 - 1,3,5 - 己三烯,DPH)标记兔红细胞膜:DPH 嵌入膜脂质双分子层,其荧光偏振度与膜流动性负相关 —— 膜流动性越高,DPH 分子运动越自由,荧光偏振度越低;反之则偏振度越高。
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探针标记:取 0.5mL 1% 兔红细胞悬液,加入终浓度为 5μmol/L 的 DPH 乙醇溶液,37℃避光孵育 30 分钟(让 DPH 嵌入膜中)。
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洗涤除杂:3000rpm 离心 5 分钟,弃上清,用 PBS 重悬红细胞,重复洗涤 2 次,去除未结合的 DPH。
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荧光检测:用荧光分光光度计检测荧光偏振度(激发波长 360nm,发射波长 430nm),计算膜流动性相关参数(如偏振度 P、微黏度 η)。