兔红细胞——红细胞膜流动性检测实验

发布时间:2025-09-05 / 浏览数:73

实验原理

利用荧光探针(如 1,6 - 二苯基 - 1,3,5 - 己三烯,DPH)标记兔红细胞膜:DPH 嵌入膜脂质双分子层,其荧光偏振度与膜流动性负相关 —— 膜流动性越高,DPH 分子运动越自由,荧光偏振度越低;反之则偏振度越高。



兔红细胞悬液


操作步骤

  1. 探针标记:取 0.5mL 1% 兔红细胞悬液,加入终浓度为 5μmol/L 的 DPH 乙醇溶液,37℃避光孵育 30 分钟(让 DPH 嵌入膜中)。

  2. 洗涤除杂:3000rpm 离心 5 分钟,弃上清,用 PBS 重悬红细胞,重复洗涤 2 次,去除未结合的 DPH。

  3. 荧光检测:用荧光分光光度计检测荧光偏振度(激发波长 360nm,发射波长 430nm),计算膜流动性相关参数(如偏振度 P、微黏度 η)。



应用

  • 研究温度、pH、离子强度对红细胞膜流动性的影响;

  • 评价药物(如降脂药、抗氧化剂)对膜脂质结构的调节作用;

  • 模拟膜损伤疾病(如糖尿病、衰老)中红细胞膜流动性的变化机制。