实验原理

将可溶性抗原（如细菌毒素、病毒蛋白）吸附在豚鼠红细胞表面（致敏红细胞），若待检样本中存在特异性抗体，抗体可与致敏红细胞表面的抗原结合，使红细胞发生凝集；通过观察凝集现象判断抗体是否存在及效价。

操作步骤

1、致敏红细胞制备：取 1% 豚鼠红细胞悬液，加入适量纯化抗原（如布鲁氏菌抗原），37℃孵育 1 小时，期间轻轻振荡，使抗原吸附于红细胞表面；离心弃上清，用生理盐水重悬为 1% 致敏红细胞悬液。

2、样本稀释：在 96 孔板中，用生理盐水将待检血清（如疑似布鲁氏菌感染的动物血清）做 2 倍梯度稀释（1:2 至 1:1024），每孔 50μL；设阳性血清对照、阴性血清对照及生理盐水空白对照。

3、凝集反应：每孔加入 50μL 致敏红细胞悬液，轻轻混匀，37℃孵育 30 分钟，观察凝集结果。

4、结果判断：空白 / 阴性对照孔红细胞呈点状沉淀，待检孔出现均匀凝集块为阳性，记录能引起凝集的血清最高稀释度（抗体效价）。

应用

1、检测动物或人血清中针对可溶性抗原的抗体（如布鲁氏菌病、弓形虫病的血清学诊断）；

2、疫苗免疫效果评估（如检测免疫后机体产生的特异性抗体水平）。