实验原理

利用荧光探针（如 DiBAC4 (3)，双苯甲亚胺）标记豚鼠红细胞膜：DiBAC4 (3) 为阴离子探针，可通过细胞膜进入细胞内，其荧光强度与膜电位负相关 —— 膜电位越负（正常静息状态），探针进入越少，荧光强度越低；膜电位去极化（如膜损伤），探针进入增多，荧光强度升高。通过流式细胞术检测荧光强度，反映膜电位变化。

操作步骤

1. 探针标记：取 1mL 1% 豚鼠红细胞悬液，加入终浓度为 5μmol/L 的 DiBAC4 (3) 溶液，37℃避光孵育 20 分钟。

2. 样本处理：分为对照组（未处理红细胞）和实验组（如加入膜损伤药物的红细胞），继续孵育 10 分钟。

3. 流式检测：用流式细胞仪检测红细胞的荧光强度（激发波长 488nm，发射波长 516nm），分析两组荧光强度差异，计算膜电位变化幅度。

应用

• 研究药物、毒素对红细胞膜电位的影响（如离子通道抑制剂的作用机制）；

• 模拟病理状态（如缺氧、酸中毒）下红细胞膜电位的改变。