实验原理

巨噬细胞（如小鼠腹腔巨噬细胞）可吞噬衰老或损伤的豚鼠红细胞；通过荧光标记红细胞，或通过染色计数吞噬红细胞的巨噬细胞数量，评价巨噬细胞的吞噬功能。

操作步骤

1. 红细胞标记：取 2% 豚鼠红细胞悬液，加入终浓度为 10μmol/L 的荧光素（如 FITC），37℃避光孵育 30 分钟，生理盐水洗涤 3 次，去除未结合荧光素。

2. 巨噬细胞制备：小鼠腹腔注射 3% 巯基乙酸钠，3 天后处死，腹腔冲洗收集巨噬细胞，调整浓度至 1×10⁶个 /mL，接种于 24 孔板，37℃、5% CO₂培养 2 小时，贴壁后洗去未贴壁细胞。

3. 吞噬反应：每孔加入 500μL 荧光标记的豚鼠红细胞悬液，37℃孵育 1 小时，用 PBS 洗去未被吞噬的红细胞。

4. 计数分析：荧光显微镜下观察，计数 100 个巨噬细胞中吞噬红细胞的阳性细胞数，计算吞噬率；或用流式细胞术检测巨噬细胞的平均荧光强度，反映吞噬量。

应用

• 评价免疫调节剂（如细胞因子、中药成分）对巨噬细胞吞噬功能的影响；

• 研究衰老红细胞的吞噬清除机制（如 “吞噬信号” 分子的作用）。