实验原理

豚鼠红细胞富含营养物质（如血红蛋白、氨基酸），可作为细菌培养基的添加剂；将豚鼠红细胞加入灭菌的营养琼脂中，制成血平板，用于培养营养要求较高的细菌（如链球菌、葡萄球菌），并通过观察细菌对红细胞的溶血现象（α 溶血、β 溶血、γ 溶血）进行细菌鉴定。

操作步骤

1. 红细胞处理：取新鲜豚鼠全血，加入 3.8% 柠檬酸钠抗凝，3000rpm 离心 10 分钟，收集红细胞，用生理盐水洗涤 3 次，配制成 5% 红细胞悬液。

2. 血平板制备：将营养琼脂培养基加热融化，冷却至 50℃左右（避免高温破坏红细胞），加入 5% 红细胞悬液，轻轻混匀（避免产生气泡），倒入无菌培养皿，室温凝固。

3. 细菌接种：取待检样本（如小鼠粪便、土壤悬液），用划线法接种于血平板，37℃培养 18-24 小时。

4. 观察鉴定：观察菌落形态，并判断溶血类型：

• β 溶血：菌落周围出现透明溶血环（红细胞完全溶解）；

• α 溶血：菌落周围出现草绿色溶血环（红细胞部分溶解）；

• γ 溶血：无溶血环（红细胞不溶解）。

应用

• 分离培养营养要求高的细菌（如链球菌、肺炎克雷伯菌）；

• 细菌初步鉴定（如通过溶血类型区分链球菌种类）；

• 研究细菌的溶血毒素活性（如金黄色葡萄球菌 α 溶血素的检测）。