实验原理

鸡红细胞（靶细胞）与特异性抗鸡红细胞抗体（溶血素）结合形成 “抗原 - 抗体复合物”，该复合物可激活补体系统（如豚鼠补体）的经典途径，最终形成膜攻击复合物（MAC），导致红细胞破裂溶血；溶血程度与补体量或抗体量呈正相关。

操作步骤

1. 抗体滴定：用生理盐水将抗鸡红细胞溶血素做倍比稀释，与 1% 鸡红细胞悬液、补体按 1:1:1 混合，37℃孵育 30 分钟，确定能引起 50% 溶血的溶血素稀释度（亚溶血剂量）。

2. 补体活性检测：在试管中加入 50μL 1% 鸡红细胞悬液、50μL 亚溶血剂量的溶血素，37℃孵育 10 分钟；加入 50μL 系列稀释的补体（1:10 至 1:100），37℃孵育 30 分钟。

3. 结果计算：3000rpm 离心 5 分钟，取上清测 540nm OD 值，计算溶血率（以蒸馏水溶血为 100%），绘制补体稀释度 - 溶血率曲线，确定补体活性单位。

应用

• 定量检测补体活性（如补体缺陷模型的验证）；

• 筛选补体抑制剂（如中药成分对补体激活的抑制作用）。