实验原理

某些细菌（如产气荚膜梭菌、溶血性链球菌）可分泌溶血毒素，能直接破坏鸡红细胞膜，导致红细胞溶血；通过检测不同浓度的毒素样品对鸡红细胞的溶血率，评价毒素的活性强度。

操作步骤

1. 毒素样品制备：将待检细菌接种于营养肉汤，37℃振荡培养 24 小时，10000rpm 离心 10 分钟，取上清液（含溶血毒素），用生理盐水倍比稀释（1:2 至 1:64）。

2. 溶血反应：在 96 孔板中，每孔加入 50μL 稀释后的毒素样品，加入 50μL 1% 鸡红细胞悬液，37℃孵育 1 小时；设生理盐水对照（无毒素，不溶血）和蒸馏水对照（完全溶血）。

3. 结果测定：3000rpm 离心 5 分钟，取上清液测 540nm OD 值，计算各稀释度的溶血率；以溶血率为 50% 时的毒素稀释度作为毒素活性单位（如 1:16 稀释度溶血率 50%，则活性为 16 U/mL）。

应用

• 检测鸡源致病性细菌的溶血毒素活性（如产气荚膜梭菌 α 毒素、链球菌溶血素）；

• 筛选抑制溶血毒素的药物（如中药提取物对毒素活性的阻断作用）。