将鸡红细胞作为抗原免疫实验动物(如兔、小鼠),动物免疫系统会识别红细胞表面的抗原(如血型抗原、膜蛋白),产生特异性抗体;通过多次免疫加强,可在动物血清中获得高滴度的抗鸡红细胞抗体。
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免疫原制备:取新鲜鸡红细胞,生理盐水洗涤 3 次,配制成 10% 红细胞悬液,加入等量弗氏完全佐剂,充分乳化(形成油包水乳液,滴入水中不扩散)。
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初次免疫:家兔耳缘静脉注射乳化后的免疫原 1mL,或背部皮下多点注射(每点 0.2mL)。
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加强免疫:初次免疫后 2 周,用弗氏不完全佐剂乳化的 10% 红细胞悬液(不加佐剂)加强免疫 1 次,剂量同初次免疫;1 周后再加强 1 次。
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抗体检测与收集:末次免疫后 7 天,耳缘静脉取少量血清,用凝集试验检测抗体效价;效价达到 1:128 以上时,心脏采血,分离血清,获得抗鸡红细胞抗体。