实验原理

巨噬细胞（如鸡腹腔巨噬细胞、小鼠腹腔巨噬细胞）可吞噬鸡红细胞，通过计数吞噬红细胞的巨噬细胞数量，评价巨噬细胞的吞噬功能；该实验可用于研究免疫调节剂对吞噬细胞活性的影响。

操作步骤

1. 巨噬细胞制备：取 SPF 鸡，腹腔注射 3% 巯基乙酸钠，48 小时后处死，用生理盐水冲洗腹腔，收集巨噬细胞，调整浓度至 1×10⁶个 /mL，接种于 24 孔板，37℃、5% CO₂培养 2 小时，贴壁后洗去未贴壁细胞。

2. 红细胞处理：取 1% 鸡红细胞悬液，用生理盐水洗涤 2 次，备用。

3. 吞噬反应：每孔加入 500μL 鸡红细胞悬液，37℃孵育 1 小时；用 PBS 轻轻洗去未被吞噬的红细胞，加入甲醇固定 10 分钟，Giemsa 染色 15 分钟，流水冲洗晾干。

4. 计数分析：显微镜下观察（400×），计数 100 个巨噬细胞中吞噬鸡红细胞的阳性细胞数，计算吞噬率；同时计数每个阳性巨噬细胞吞噬的红细胞数，计算吞噬指数。

应用

• 评价免疫增强剂（如黄芪多糖、益生菌）对鸡巨噬细胞功能的调节作用；

• 研究鸡感染（如细菌、寄生虫）后吞噬细胞活性的变化。