鸡红细胞——血平板制备与细菌分离实验

发布时间:2025-11-01 / 浏览数:5

实验原理

鸡红细胞富含血红蛋白、氨基酸等营养物质,加入营养琼脂后制成血平板,可满足营养要求较高的细菌(如链球菌、葡萄球菌)生长;部分细菌能分泌溶血毒素,使平板上的红细胞溶解,通过溶血类型可初步鉴定细菌。

操作步骤

  1. 红细胞处理:取新鲜鸡全血,加入 3.8% 柠檬酸钠抗凝(抗凝剂:全血 = 1:9),3000rpm 离心 10 分钟,收集红细胞,用生理盐水洗涤 3 次,配制成 5% 红细胞悬液。

  2. 血平板制备:将营养琼脂培养基加热融化,冷却至 50℃(避免高温破坏红细胞),加入 5% 红细胞悬液,轻轻混匀(避免气泡),倒入无菌培养皿,室温凝固。

  3. 细菌接种:取待检样本(如鸡粪便、呼吸道拭子),用划线法接种于血平板,37℃培养 18-24 小时。

  4. 观察鉴定:观察菌落形态及溶血环:

    • β 溶血:菌落周围出现透明溶血环(红细胞完全溶解);

    • α 溶血:菌落周围出现草绿色溶血环(红细胞部分溶解);

    • γ 溶血:无溶血环(红细胞不溶解)。

应用

  • 鸡源致病性细菌(如鸡链球菌、金黄色葡萄球菌)的分离培养;

  • 细菌初步鉴定(如通过溶血类型区分链球菌种类)。

鸡红细胞悬液

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