实验原理

特异性抗体（如抗流感病毒抗体）可与病毒表面的血凝素结合，阻断病毒与鸡红细胞受体的相互作用，从而抑制红细胞凝集；通过该现象检测待检样本中特异性抗体的效价，或鉴定病毒血清型。

操作步骤

1. 血清处理：待检鸡血清 56℃灭活 30 分钟（去除自身非特异性抑制物），用生理盐水倍比稀释（1:2 至 1:256），每孔 50μL；设阳性血清对照、阴性血清对照及生理盐水对照。

2. 病毒孵育：每孔加入 50μL 预先滴定好的 “4 个血凝单位（HAU）” 病毒液，37℃孵育 15 分钟（让抗体与病毒充分结合）。

3. 红细胞反应：每孔加入 50μL 1% 鸡红细胞悬液，室温静置 30 分钟，观察凝集抑制现象。

4. 结果判断：能完全抑制凝集的血清最高稀释度即为 HI 效价；阳性对照孔应出现抑制，阴性 / 空白对照孔应出现凝集。

应用

• 鸡流感病毒、新城疫病毒的血清型鉴定；

• 鸡群免疫后抗体水平监测（如流感疫苗免疫效果评价）。