实验原理

将药物与含 FBS 的营养琼脂混合，制成含不同药物浓度的琼脂平板，FBS 补充细菌生长所需的生长因子（尤其适用于营养要求高的细菌）；接种细菌后，药物在琼脂中扩散形成浓度梯度，通过观察细菌菌落生长情况，判断细菌对药物的敏感性。

操作步骤

1. 培养基制备：将营养琼脂加热融化，冷却至 50℃时，加入 10% FBS 和梯度稀释的药物（如 1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL 等），轻轻混匀，倒入无菌培养皿，凝固后制成药物琼脂平板；设不含药物的 FBS 营养琼脂为对照平板。

2. 细菌制备：将待检细菌（如链球菌、结核分枝杆菌）接种于含 5% FBS 的肉汤培养基，37℃培养至对数期，调整浓度至 1×10⁶ CFU/mL。

3. 接种培养：用微量接种环取 1μL 细菌悬液，点种于药物平板和对照平板，每板点种 3 个重复，37℃培养 18-24 小时（结核分枝杆菌需培养 7 天）。

4. 结果判断：对照平板菌落正常生长，药物平板中无菌落生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度（MIC），MIC≤临界值为敏感，高于临界值为耐药。

应用

• 营养要求高的细菌（如动物源致病性链球菌、支原体）的药敏定性；

• 临床分离菌对新型抗生素的敏感性鉴定；

• 细菌耐药性监测与药物筛选。