杂交瘤细胞培养制备单克隆抗体实验
发布时间:2025-11-19 / 浏览数:2
实验原理:
杂交瘤细胞体外培养对营养要求高,胎牛血清含其生长所需的生长因子、氨基酸等营养成分,能维持杂交瘤细胞的增殖活性,使其稳定分泌特异性抗体。
操作步骤:
①将免疫后的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞;
②用含 10% 优级胎牛血清的 RPMI - 1640 培养基,在 96 孔板中对杂交瘤细胞进行克隆化培养;
③定期换液,观察细胞生长情况,通过抗原抗体反应筛选出能分泌目标抗体的阳性克隆;
④扩大培养阳性克隆细胞,收集上清液纯化单克隆抗体。
应用:
用于单克隆抗体的制备,如诊断试剂用抗体、科研用特异性抗体的研发生产。