视网膜干细胞分化诱导实验
发布时间:2025-11-21 / 浏览数:0
实验原理:
胎牛血清中富含的生长因子和信号分子,可调控干细胞的基因表达,诱导视网膜干细胞摆脱未分化状态,向具有特定功能的视网膜神经节样细胞分化,10% 浓度的胎牛血清能为该分化过程提供稳定营养和适宜的诱导微环境。
操作步骤:
①取出生 5 天的大鼠视网膜组织,用胰蛋白酶分离获得混合细胞;
②配置含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,将混合细胞接种培养瓶中培养;
③24 小时后观察细胞贴壁情况,48 小时进行首次换液,待 7 - 10 天细胞融合成片后进行传代;
④传至第 3 - 5 代时,通过免疫荧光法和 RT - PCR 检测细胞中视网膜神经节细胞标志物的表达情况。
应用:
用于视网膜再生医学研究,为视网膜神经损伤、青光眼等疾病导致的视网膜神经细胞损伤,提供细胞治疗的种子细胞诱导方案参考。