兔红细胞直接凝集试验

发布时间:2025-12-02 / 浏览数:37

实验原理

兔红细胞表面存在特定受体(如糖蛋白、糖脂),若待检样本中含能与该受体结合的物质(如植物凝集素、细菌表面抗原),可使红细胞失去表面电荷、相互聚集形成肉眼可见的凝集块;未凝集的红细胞则呈点状沉淀。


操作步骤

  1. 样本稀释:在 96 孔板中,用生理盐水将待检样本(如刀豆凝集素溶液、细菌菌液)做 2 倍梯度稀释(1:2 至 1:1024),每孔 50μL;设生理盐水空白对照。

  2. 红细胞反应:每孔加入 50μL 1% 兔红细胞悬液(兔全血经抗凝、生理盐水洗涤 3 次后配制),轻轻振荡混匀,37℃孵育 30 分钟。

  3. 结果判断:空白对照孔红细胞呈点状沉淀,待检孔出现均匀凝集块为阳性,记录能引起凝集的最低样本稀释度(凝集效价)。


应用

  • 鉴定植物凝集素(如刀豆凝集素、花生凝集素)的生物学活性;

  • 快速筛查含凝集活性的细菌(如沙门氏菌、布鲁氏菌);

  • 辅助诊断红细胞相关自身免疫病(如自身免疫性溶血性贫血)。


凝集试验