实验原理

利用马血清中不同蛋白在不同盐浓度下的溶解度差异，通过硫酸铵盐析法初步分离白蛋白（白蛋白在 50%-60% 硫酸铵饱和度下可沉淀）；结合透析脱盐，获得初步纯化的马血清白蛋白。

操作步骤

1. 盐析沉淀：取 10mL 马血清，缓慢加入硫酸铵粉末至饱和度 50%，4℃搅拌 2 小时，8000rpm 离心 20 分钟，弃上清（含球蛋白）；沉淀用少量生理盐水溶解。

2. 二次盐析：向溶解液中继续加入硫酸铵至饱和度 60%，4℃静置 1 小时，离心收集沉淀（含白蛋白）。

3. 透析脱盐：将沉淀溶解后转入透析袋，用生理盐水 4℃透析 24 小时（更换 3 次透析液），去除盐离子。

4. 纯度鉴定：SDS-PAGE 电泳检测白蛋白纯度，BCA 法测定蛋白浓度，-80℃保存。

应用

• 制备马血清白蛋白标准品，用于蛋白定量实验；

• 马血清白蛋白的结构与功能研究（如载体功能、抗氧化活性）。