实验原理

马疱疹病毒需在宿主细胞（如马肾细胞）内复制，含 5%-10% 马血清的培养基可为宿主细胞提供营养支持，维持细胞正常生理状态，为病毒复制、组装提供适宜环境，提高病毒产量。

操作步骤

1. 细胞准备：用含 10% 马血清的 DMEM 培养基培养马肾细胞，接种至 T-75 培养瓶，培养至细胞融合度达 70%。

2. 病毒接种：弃去培养基，加入适量马疱疹病毒液（MOI=0.1），37℃吸附 1 小时，期间每 15 分钟振荡 1 次。

3. 培养与收集：吸附后加入含 5% 马血清的维持培养基，37℃培养 48-72 小时，观察细胞病变（CPE，如细胞圆缩、脱落）；待 CPE 达 80% 时，反复冻融 3 次，10000rpm 离心 10 分钟，收集上清液（含病毒）。

4. 病毒滴度检测：用 TCID₅₀法测定病毒滴度，评估增殖效果。

应用

• 马疱疹病毒的体外增殖与纯化，支撑疫苗研发或病毒特性研究；

• 病毒与宿主细胞相互作用机制的基础研究。