兔红细胞——间接凝集试验

发布时间:2025-12-04 / 浏览数:26

实验原理

将可溶性抗原(如病毒蛋白、细菌毒素)吸附于兔红细胞表面(致敏红细胞),若待检样本中存在特异性抗体,可与致敏红细胞表面的抗原结合,引发红细胞凝集;通过该现象实现抗体的定性与定量检测。


操作步骤

  1. 致敏红细胞制备:取 1% 兔红细胞悬液,加入适量纯化抗原(如乙肝表面抗原、禽流感病毒 HA 蛋白),37℃孵育 1 小时,期间每 15 分钟振荡 1 次;3000rpm 离心 5 分钟,弃上清,用生理盐水重悬为 1% 致敏红细胞悬液。

  2. 样本稀释:待检血清用生理盐水做 2 倍梯度稀释(1:2 至 1:12800),每孔 50μL;设阳性血清、阴性血清及空白对照。

  3. 凝集反应:每孔加入 50μL 致敏红细胞悬液,37℃孵育 30 分钟,观察凝集结果。

  4. 结果判断:阴性 / 空白对照孔无凝集,待检孔出现凝集为阳性,记录最高阳性稀释度(抗体效价)。


应用

  • 血清学诊断(如乙肝、丙肝、弓形虫病的抗体检测);

  • 疫苗免疫效果评估(如监测免疫后机体产生的特异性抗体水平);

  • 可溶性抗原的定量检测(如病毒抗原、肿瘤标志物)。


间接凝集试验