实验原理

流感病毒、新城疫病毒等表面含血凝素（HA），可与兔红细胞表面的唾液酸受体结合导致凝集；若待检血清中存在特异性抗体，可竞争性结合病毒 HA，阻断凝集反应。通过抑制效果判断抗体效价，或鉴定病毒血清型。

操作步骤

1. 血清处理：待检血清 56℃灭活 30 分钟（去除非特异性抑制物），用生理盐水倍比稀释（1:2 至 1:256），每孔 50μL；设阳性血清、阴性血清及空白对照。

2. 病毒孵育：每孔加入 50μL 预先滴定好的 “4 个血凝单位（HAU）” 病毒液，37℃孵育 15 分钟（让抗体与病毒充分结合）。

3. 红细胞反应：每孔加入 50μL 1% 兔红细胞悬液，室温静置 30 分钟，观察凝集抑制现象。

4. 结果判断：能完全抑制凝集的血清最高稀释度即为 HI 效价；阳性对照孔应出现抑制，阴性 / 空白对照孔应出现凝集。

应用

• 流感病毒、新城疫病毒等血凝性病毒的血清型鉴定；

• 动物或人血清中病毒抗体水平监测（如流感疫苗免疫效果评价）；

• 疫情溯源与流行病学调查。