兔红细胞——渗透脆性实验

发布时间:2025-12-07 / 浏览数:5

实验原理

兔红细胞膜对渗透压敏感:在等渗溶液(0.9% NaCl)中形态正常,在低渗溶液中因水分渗入导致肿胀、破裂(溶血);细胞膜完整性或成分异常(如膜蛋白 / 脂质损伤)会改变其渗透脆性(损伤则脆性升高,易溶血)。


操作步骤

  1. 梯度低渗盐溶液配制:在 12 支试管中,分别配制 0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.7%、0.8%、0.85%、1.0% 的 NaCl 溶液,每管 5mL。

  2. 溶血反应:每管加入 0.1mL 2% 兔红细胞悬液,轻轻颠倒混匀,37℃孵育 30 分钟。

  3. 溶血率测定:3000rpm 离心 5 分钟,取上清液在 540nm 处测吸光度(OD 值);以 0.1% NaCl 溶液(完全溶血)的 OD 值为 100% 溶血率,计算各管溶血率。

  4. 结果判断:溶血率 50% 时对应的 NaCl 浓度为 “脆性中点”,兔正常脆性中点约 0.45%-0.5% NaCl;低于该范围为脆性升高,高于则为脆性降低。


应用

  • 研究药物、毒素(如重金属离子、抗生素)对红细胞膜的损伤机制;

  • 模拟红细胞膜疾病(如遗传性球形红细胞增多症)的病理模型;

  • 评价营养因素(如维生素 E、硒)对细胞膜稳定性的影响。


检测细胞膜稳定性

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