实验原理

采用固相萃取法净化大鼠血浆中的 siRNA，去除杂质干扰，结合 X500B QTOF 质谱系统的高分辨多反应监测模式，通过负离子模式检测 siRNA 的特征离子信号，实现定量分析。

操作步骤

1. 样品预处理：90μL 大鼠血浆中加入 siRNA 标准品和内标溶液，涡旋混匀后加裂解缓冲液震荡。

2. 固相萃取：用 Clarity OTX™萃取试剂盒活化、平衡萃取板，上样后多次淋洗，洗脱液经氮气吹干后复溶。

3. 质谱检测：通过 ExionLC™ AD 系统结合质谱仪，以设定的液相和质谱条件检测复溶样品。

4. 定量计算：根据标准曲线和检测到的离子峰面积计算 siRNA 浓度。

应用

用于寡核苷酸类药物的临床前药代动力学研究；分析 siRNA 药物在大鼠体内的吸收、分布和代谢规律，为 siRNA 药物研发提供数据支撑。