大鼠血浆中人重组干扰素绝对定量实验
发布时间:2025-12-17 / 浏览数:2
实验原理
利用 Target MS2 质谱方法,通过筛选人重组干扰素的特异性肽段,以该肽段的碎片离子峰面积为依据绘制标准曲线,进而推算大鼠血浆中目标蛋白的绝对浓度,高分辨质谱可实现高灵敏度和高匹配度的检测。
操作步骤
1. 肽段筛选:用 Full MS/ddMS2 方法鉴定人重组干扰素标准品酶解后的特异性肽段。
2. 标准曲线绘制:将酶解肽段稀释成系列浓度,掺入空白大鼠血浆酶解肽段中,上样后用 Target MS2 方法检测,根据峰面积绘制标准曲线。
3. 样本检测:取给药组大鼠血浆酶解肽段上样,依据标准曲线计算血浆中重组干扰素的浓度。
应用
用于生物药临床前药代动力学研究,监测注射入大鼠体内的重组蛋白药物浓度变化;
评估重组蛋白药物的体内代谢效率和稳定性。