大鼠血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性检测实验
发布时间:2025-12-27 / 浏览数:2
实验原理
LDH 可催化乳酸转化为丙酮酸,同时将辅酶 I(NAD⁺)还原为 NADH,NADH 在 340nm 处有特征吸收峰,通过检测吸光度的变化速率,可计算 LDH 的活性,LDH 活性升高常提示组织细胞损伤。
操作步骤
1. 反应体系配制:在试管中加入缓冲液、乳酸溶液、NAD⁺溶液,混合均匀。
2. 启动反应:加入 50μL 大鼠血浆,迅速混匀并放入分光光度计。
3. 动态检测:记录 340nm 处吸光度随时间的变化,持续 3 分钟。
4. 活性计算:根据吸光度变化速率和摩尔消光系数,计算血浆中 LDH 的活性单位。
应用
| 用于评估药物、创伤等因素对大鼠心肌、肝脏等组织的损伤程度;辅助诊断感染、缺血等病理状态下的组织细胞损伤情况。 |