实验原理

凝血因子 Ⅷ 是内源性凝血途径的核心因子，缺乏会导致凝血功能障碍。采用一期凝血法，将待测羊血浆与缺乏因子 Ⅷ 的基质血浆混合，激活内源性凝血途径，通过检测活化部分凝血活酶时间（APTT）的缩短程度，计算因子 Ⅷ 的活性（FⅧ:C）。

操作步骤

1、试剂准备：配制乏因子 Ⅷ 基质血浆、APTT 试剂、氯化钙溶液。

2、样本稀释：羊血浆用生理盐水做 1:10 稀释，加入乏因子 Ⅷ 基质血浆（体积比 1:1），混匀。

3、凝血检测：取混合液 100μL 加入血凝仪杯，加入 APTT 试剂 100μL，37℃孵育 3 分钟；加入 25mmol/L CaCl₂溶液 100μL，记录 APTT 值。

4、活性计算：以标准血浆的 FⅧ:C 为参照，通过标准曲线计算待测羊血浆的 FⅧ:C 活性（正常参考值 70%-150%）。

应用

• 研究绵羊出血性疾病（如遗传性因子 Ⅷ 缺乏症）的发病机制；

• 评估血浆制品中凝血因子的活性，为凝血因子类生物药研发提供数据。