羊血浆中免疫球蛋白 G(IgG)纯化实验
发布时间:2026-01-13 / 浏览数:7
利用不同蛋白质在不同硫酸铵饱和度下的溶解度差异,IgG 在 50% 硫酸铵饱和度下可沉淀,而白蛋白等杂蛋白仍溶解;通过盐析、透析脱盐,可获得初步纯化的羊 IgG。
1. 盐析沉淀:取 10mL 羊血浆,4℃磁力搅拌下缓慢加入硫酸铵粉末至饱和度 50%,静置 2 小时;8000rpm 离心 20 分钟,收集沉淀。
2. 复溶与透析:沉淀用少量生理盐水溶解,转入透析袋,4℃生理盐水透析 24 小时(更换 3 次透析液),去除硫酸铵。
3. 纯度鉴定:通过 SDS-PAGE 电泳检测 IgG 纯度,BCA 法测定蛋白浓度。
1. 制备羊 IgG 标准品,用于免疫检测实验的校准;
2. 为羊源多克隆抗体的制备提供原料,支撑兽医诊断试剂研发。
